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目的:了解人肝癌细胞系HepG2细胞内人乳头瘤病毒( HPV)基因组的物理状态,胞质内包涵体物质的性质以及晚期衣壳蛋白1(L1)表达。方法用PCR对细胞内HPV18型E2和E6基因进行扩增,判断HPV18基因组的物理状态;用ELISA、光镜和电镜的免疫组化、Western blot 等方法,以多价HPV L1小鼠单克隆抗体做探针,检测HepG2细胞内L1蛋白表达;用反转录PCR检测细胞内L1 mRNA表达。结果 HepG2细胞内HPV DNA基因组呈整合状态;细胞裂解液中有HPV L1蛋白存在;细胞呈HPV L1阳性反应;胞质内包涵体样物质,由均匀的颗粒样物质组成,可以为胶体金标记的HPV L1抗体所标识。 HepG2细胞裂解液中有HPV L1蛋白,在56 ku区出现与HeLa细胞一样的L1特异阳性条带。反转录PCR检测显示HepG2细胞内有L1 mRNA存在。结论 HepG2是HPV18阳性细胞,细胞内HPV DNA基因组呈整合状态。细胞内包涵体样物质为HPV18 L1蛋白,HepG2细胞可以表达L1。

作者:杜义江;肖长义;郑军;胡敏

来源:基础医学与临床 2015 年 1期

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杜义江;肖长义;郑军;胡敏
来源:
基础医学与临床 2015 年 1期
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HepG2细胞 人乳头瘤病毒 病毒基因组 物理状态 L1蛋白 HepG2 cells human papillomavirus virus genome physical state late capsid protein 1
目的:了解人肝癌细胞系HepG2细胞内人乳头瘤病毒( HPV)基因组的物理状态,胞质内包涵体物质的性质以及晚期衣壳蛋白1(L1)表达。方法用PCR对细胞内HPV18型E2和E6基因进行扩增,判断HPV18基因组的物理状态;用ELISA、光镜和电镜的免疫组化、Western blot 等方法,以多价HPV L1小鼠单克隆抗体做探针,检测HepG2细胞内L1蛋白表达;用反转录PCR检测细胞内L1 mRNA表达。结果 HepG2细胞内HPV DNA基因组呈整合状态;细胞裂解液中有HPV L1蛋白存在;细胞呈HPV L1阳性反应;胞质内包涵体样物质,由均匀的颗粒样物质组成,可以为胶体金标记的HPV L1抗体所标识。 HepG2细胞裂解液中有HPV L1蛋白,在56 ku区出现与HeLa细胞一样的L1特异阳性条带。反转录PCR检测显示HepG2细胞内有L1 mRNA存在。结论 HepG2是HPV18阳性细胞,细胞内HPV DNA基因组呈整合状态。细胞内包涵体样物质为HPV18 L1蛋白,HepG2细胞可以表达L1。