目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBXAg)反式激活基因4(XTP4)对肝母细胞瘤细胞HepG2细胞凋亡的影响.方法 构建XTP4基因的真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)A-XTP4 (pXTP4)及化学合成XTP4基因的干扰RNA (siXTP4)后,分别将XTP4基因的真核表达质粒、干扰RNA及各自的阴性对照(NC、siNC)瞬时转染HepG2细胞中,48 h后进行以下实验:用Western blot验证XTP4在蛋白水平的过表达和干扰表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白水平并计算Bcl-2/Bax比值;化学发光法检测胱冬肽酶-3(caspase-3)的活性.结果 成功构建了XTP4的真核表达质粒pXTP4、XTP4在蛋白水平过表达和干扰表达.与各自的阴性对照组相比,过表达XTP4的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数显著减少(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P＜0.05),胱冬肽酶-3活性下降(P＜0.05);而干扰XTP4表达的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数显著增加(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05),胱冬肽酶-3活性上升(P＜0.05).结论 XTP4具有抑制HepG2细胞凋亡的作用,可能是通过增加Bcl-2/Bax的比值实现.
作者：时朝辉；张梦然；王丽丽；刘顺爱；梁璞；吴君；成军；梁跃东
来源：基础医学与临床 2015 年 35卷 12期
