目的 探讨在肝母细胞瘤HepG2细胞凋亡中乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因4(XTP4)的作用及其机制. 方法 在HepG2细胞中瞬时转染XTP4的表达质粒pcDNA3.1/mycHis(-)A-XTP4及XTP4基因的小干扰RNA及各自的阴性对照,48 h后用蛋白质印迹法检测在HepG2细胞中XTP4的过表达和干扰表达情况;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡;蛋白质印迹法检测各组HepG2细胞中凋亡相关蛋白P53、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平,并计算Bcl-2/Bax比值;化学发光法检测HepG2细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性.计量资料以均值±标准差表示,两组间比较采用独立样本t检验. 结果 在HepG2细胞中成功实现XTP4蛋白的过表达和干扰表达.与对照组相比,在HepG2细胞中过表达XTP4可以使凋亡细胞数显著减少(P＜ 0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P＜0.05),P53蛋白表达降低(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达降低,Caspase-3活性下降(P＜0.05);而在HepG2细胞中用干扰RNA抑制XTP4表达可以使凋亡细胞数显著增加(P＜ 0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05),P53蛋白表达增加(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达增加,Caspase-3活性上升(P＜ 0.05). 结论 在HepG2细胞凋亡中XTP4具有抑制作用,其抑制HepG2细胞凋亡的作用可能是通过调节Bcl-2/Bax比值实现,P53蛋白可能参与其中.

作者：刘俊英；李涵；刘洋；时朝辉；梁祖兰；王玲慧；张钰；赵媛；范玉梅；吴斌；于彦章

来源：中华肝脏病杂志 2019 年 27卷 9期