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目的 探讨铁过载对体外原代培养的小鼠睾丸支持细胞(SC)的影响.方法 取原代分离培养小鼠睾丸SC纯化并鉴定,加入不同浓度(50、100、200 μmol/L)右旋糖酐铁注射液,培养至24、48和72 h后收集细胞,光学显微镜与流式细胞术鉴定铁过载,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,Western blot与免疫细胞化学检测闭锁蛋白(occludin)、雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(TRF)、抑制素(INH)和波形蛋白(VIM)的表达.结果 与对照组相比,铁过载组细胞内ROS、MDA、NO与NOS的含量显著增高(P<0.01),GSH含量、SOD和GSH-Px的活性显著降低(P<0.01),occludin、ABP、TRF、INH和VIM蛋白的表达明显降低(P<0.05).结论 铁过载可导致体外培养的睾丸支持细胞氧化性损伤并降低其功能.

作者:李莉;赵昱;龚淼;王慧娟;高福禄

来源:基础医学与临床 2016 年 36卷 3期

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作者:
李莉;赵昱;龚淼;王慧娟;高福禄
来源:
基础医学与临床 2016 年 36卷 3期
标签:
铁过载 支持细胞 小鼠 ROS 氧化损伤 iron overload Sertoli cell mouse ROS oxidative damage
目的 探讨铁过载对体外原代培养的小鼠睾丸支持细胞(SC)的影响.方法 取原代分离培养小鼠睾丸SC纯化并鉴定,加入不同浓度(50、100、200 μmol/L)右旋糖酐铁注射液,培养至24、48和72 h后收集细胞,光学显微镜与流式细胞术鉴定铁过载,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,Western blot与免疫细胞化学检测闭锁蛋白(occludin)、雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(TRF)、抑制素(INH)和波形蛋白(VIM)的表达.结果 与对照组相比,铁过载组细胞内ROS、MDA、NO与NOS的含量显著增高(P<0.01),GSH含量、SOD和GSH-Px的活性显著降低(P<0.01),occludin、ABP、TRF、INH和VIM蛋白的表达明显降低(P<0.05).结论 铁过载可导致体外培养的睾丸支持细胞氧化性损伤并降低其功能.