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目的 建立体外结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨膜联蛋白A1(ANXA1)对卡介苗(BCG)菌株诱导的RAW246.7细胞炎性反应及凋亡的调控作用.方法 用BCG感染RAW246.7细胞.用RT-qPCR检测ANXA1、IL-6和TNF-αmRNA表达.Western blot检测ANXA1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及caspase-3的表达;用MTT检测细胞存活率;用ELISA检测细胞的凋亡率;ELISA试剂盒检测细胞因子IL-6和TNF-α的含量.结果 ANXA1在BCG感染的巨噬细胞RAW246.7中明显下调(P<0.05),并呈时间依赖性.ANXA1高表达显著降低BCG刺激诱导的炎性细胞因子IL-6和TNF-α的表达水平(P<0.05).此外,过表达ANXA1明显提高BCG感染的巨噬细胞的存活率(P<0.05),并抑制细胞凋亡,通过上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达同时下调促凋亡蛋白Bax的表达水平(P<0.05),并降低caspase-3的蛋白表达量(P<0.05).结论 ANXA1能够抑制BCG刺激诱导巨噬细胞的炎性应答进程及凋亡,为结核病的临床研究和治疗提供了理论基础.

作者:姬文兰;王启源

来源:基础医学与临床 2018 年 38卷 8期

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作者:
姬文兰;王启源
来源:
基础医学与临床 2018 年 38卷 8期
标签:
膜联蛋白A1(ANXA1) 细胞凋亡 炎性应答 结核分枝杆菌
目的 建立体外结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨膜联蛋白A1(ANXA1)对卡介苗(BCG)菌株诱导的RAW246.7细胞炎性反应及凋亡的调控作用.方法 用BCG感染RAW246.7细胞.用RT-qPCR检测ANXA1、IL-6和TNF-αmRNA表达.Western blot检测ANXA1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及caspase-3的表达;用MTT检测细胞存活率;用ELISA检测细胞的凋亡率;ELISA试剂盒检测细胞因子IL-6和TNF-α的含量.结果 ANXA1在BCG感染的巨噬细胞RAW246.7中明显下调(P<0.05),并呈时间依赖性.ANXA1高表达显著降低BCG刺激诱导的炎性细胞因子IL-6和TNF-α的表达水平(P<0.05).此外,过表达ANXA1明显提高BCG感染的巨噬细胞的存活率(P<0.05),并抑制细胞凋亡,通过上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达同时下调促凋亡蛋白Bax的表达水平(P<0.05),并降低caspase-3的蛋白表达量(P<0.05).结论 ANXA1能够抑制BCG刺激诱导巨噬细胞的炎性应答进程及凋亡,为结核病的临床研究和治疗提供了理论基础.