从慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血中扩增X基因序列,克隆入pGEM-Teasy质粒,随机挑选克隆进行DNA测序以确定病毒的变异程度.结果提示,HBV长期携带者体内有HBV准种共存,X区内存在热点缺失突变区.为了进一步探讨X区突变对X蛋白反式激活功能的影响,将野生株及不同缺失突变的X基因片段克隆入pcDNA3.1(-)载体的EcoRI位点,构建重组表达质粒,并分别与报告质粒pSV-lacZ共转染HepG2细胞,提取细胞裂解液,检测SV40启动子调控下的β-半乳糖苷酶表达活性.共转染结果显示:野生株X蛋白能够反式激活SV40病毒早期启动子.提示X区不同核苷酸缺失突变和点突变均在不同程度上降低了其反式激活作用.
作者：刘妍；董菁；皇甫竞坤；成军；王琳；王刚；李莉
来源：解放军医学杂志 2002 年 27卷 2期
