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探讨肺内基因转染、补充肺内IFN-γ水平的可行性.构建重组大鼠IFN-γ真核表达载体,转染免疫低下大鼠肺内.鉴定外源性质粒,并检测BALF和血清中IFN-γ浓度和活性.结果发现:构建的重组载体中IFN-γ的基因序列与Gene Bank中大鼠的IFN-γ cDNA序列相同.转染后BALF中细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的基因片段条带,转染后21天仍可见其表达.pLXSN-IFN载体组BALF中大鼠IFN-γ浓度和活性显著高于pLXSN空载体组.血清中IFN-γ浓度和活性二组间差异无显著性意义(P>0.05).提示本研究构建的重组大鼠IFN-γ真核表达载体可成功地转染大鼠肺内,整合入基因组DNA,分泌有活性的IFN-γ,并较长期地表达.

作者:马壮;钱桂生;黄桂君

来源:解放军医学杂志 2002 年 27卷 2期

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作者:
马壮;钱桂生;黄桂君
来源:
解放军医学杂志 2002 年 27卷 2期
标签:
干扰素Ⅱ型 免疫减低宿主 基因疗法
探讨肺内基因转染、补充肺内IFN-γ水平的可行性.构建重组大鼠IFN-γ真核表达载体,转染免疫低下大鼠肺内.鉴定外源性质粒,并检测BALF和血清中IFN-γ浓度和活性.结果发现:构建的重组载体中IFN-γ的基因序列与Gene Bank中大鼠的IFN-γ cDNA序列相同.转染后BALF中细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的基因片段条带,转染后21天仍可见其表达.pLXSN-IFN载体组BALF中大鼠IFN-γ浓度和活性显著高于pLXSN空载体组.血清中IFN-γ浓度和活性二组间差异无显著性意义(P>0.05).提示本研究构建的重组大鼠IFN-γ真核表达载体可成功地转染大鼠肺内,整合入基因组DNA,分泌有活性的IFN-γ,并较长期地表达.