目的构建mda-7/IL-24腺病毒,检测其对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响.方法将mda-7/IL-24 cDNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,在大肠杆菌BJ 5183中将重组病毒穿梭质粒和骨架质粒重组.在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,用PCR方法鉴定后,通过TCID50法测定病毒滴度.用滴度为50pfu/细胞的重组腺病毒Ad.mda-7/IL-24感染NCI-H446细胞72h后,经MTT实验检测其对细胞增殖的影响,并用Western blot方法检测mda-7/IL-24在NCI-446中的表达.结果核酸序列测定和PCR鉴定表明成功构建Ad.mda-7/IL-24;TCID50法测定扩增的腺病毒滴度为2×1010pfu/ml.Ad.mda-7/IL-24在NCI-H446细胞中表达MDA-7/IL-24,MTT检测表明Ad.mda-7/IL-24明显抑制NCI-H446细胞生长,抑制率为21.37
作者：马群风；江红；刘锟；朱捷；郑晓飞
来源：解放军医学杂志 2006 年 31卷 7期
