目的 检测靶向RNAi抑制hTERT基因对HepG2肝癌细胞凋亡的促进作用及其与线粒体凋亡途径的关系,探讨hTERT干扰促进细胞凋亡的可能机制.方法 收集第20代hTERT基因RNAi真核表达载体稳定转染细胞、对照细胞(转染空载体质粒)及未转染HepG2细胞,采用Western blot检测线粒体、胞质细胞色素C (cyt C)的表达及细胞内caspase-9、Bcl-2、Bax和hTERT的表达.结果 与未转染细胞和对照细胞相比,转染细胞hTERT、Bcl-2和线粒体cyt C表达明显减少,Bax和胞质cyt C表达明显增加;未转染细胞及对照细胞仅见约46kD的前caspase-9条带,转染细胞可见46kD前caspase-9条带和35kD caspase-9 p35亚基条带.结论 RNAi靶向抑制hTERT基因可通过抑制Bcl-2表达和促进Bax表达引起线粒体cyt C释入胞质,激活caspase-9促进HepG2肝癌细胞凋亡.
作者:郭丽萍;房殿春;张汝钢;罗元辉
来源:解放军医学杂志 2006 年 31卷 11期