目的 研究采用新改良聚合酶链反应(PCR)/连接酶检测反应(LDR)/毛细管电泳技术产前诊断胎儿β-地中海贫血的可行性.方法 使用不同浓度梯度的正常DNA与微量β-地中海贫血突变杂合子DNA混合后进行PCR扩增,扩增产物进行LDR反应后通过毛细管电泳技术检测其连接产物.采用CEC8000型遗传分析仪分析LDR产物,并观察其灵敏度.结果 将含有相同浓度CD17(A→T)突变的扩增产物作为LDR模板,采用8U DNA连接酶进行连接反应,检测灵敏度可达1∶5000,产物峰的面积随着正常人外周血DNA浓度的增加而减少,至1∶10000处不能与杂峰区分,且无CD 17(A→T)突变扩增产物的阴性对照未检测到LDR产物.正常孕妇血浆DNA中加入20pg CD17(A→T)突变杂合子外周血DNA扩增产物,LDR产物峰可明显与杂峰区分.结论 新改良PCR/LDR/毛细管电泳技术有望通过孕妇血浆DNA检测进行β-地中海贫血的产前诊断.
作者：廖茜；易萍；郑英如；俞丽丽；钟小林；黄寅虎；韩磊；朱玉娟；李力
来源：解放军医学杂志 2014 年 39卷 3期
