目的 探讨FAT10的碳末端双甘酸缺失突变体对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响.方法 收集宫颈原位癌组织标本和正常宫颈组织标本各5例,Western blotting法检测组织中FAT10蛋白的表达.采用定点突变技术构建pcDNA3.0-flag-FAT 10ΔGG质粒,分别将野生型FAT 10、FAT10ΔGG及空载体(阴性对照)瞬时转染至HeLa细胞中,以野生型Hela细胞作为空白对照组,采用Western blotting法检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖情况.转染24h后,各组细胞经顺铂诱导凋亡,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 FAT10蛋白在宫颈癌组织中的表达明显高于正常组织.过表达野生型FAT10对宫颈癌细胞的增殖有明显促进作用,但FAT10发生双甘酸突变之后,该作用受到明显抑制.流式细胞仪检测结果显示:与空白对照组(22.7%±4.2%)和阴性对照组(24.1%±3.8%)相比,过表达野生型FAT10组的细胞凋亡率(10.9%±2.0%)明显降低(P<0.05),而FAT10ΔGG组的细胞凋亡率(25.7%±5.1%)无明显变化(P>0.05).结论 FAT10可通过其碳末端双甘酸结构促进肿瘤细胞增殖,减少凋亡,从而促进肿瘤的发生发展.
作者:李翠;刘亚伟;肖霄;刘爱华;罗海华;姜勇
来源:解放军医学杂志 2014 年 39卷 12期