目的 观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠心房、心室成纤维细胞胶原蛋白表达的不同影响,并探讨其可能的分子机制.方法 用组织贴块法培养大鼠原代心房、心室成纤维细胞,经SABC免疫细胞化学染色方法鉴定细胞,分别进行以下实验:①应用羟脯氨酸消化法观察不同浓度TGF-β1(0、5、10ng/ml)及不同作用时间(6、12、24、48h)对心房、心室成纤维细胞羟脯氨酸含量的影响.②用筛选的TGF-β1最佳干预浓度及作用时间分别刺激心房、心室成纤维细胞,Western blotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)鉴定肌成纤维细胞后,采用羟脯氨酸法比较两种细胞培养液中羟脯氨酸的表达情况,RT-PCR检测二者Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的mRNA表达,Western blotting检测二者Smad2/3、p-Smad2/3及Smad7蛋白的表达情况.结果 TGF-β1对大鼠心房、心室成纤维细胞均具有促进胶原蛋白合成的作用,当TGF-β1刺激条件为5ng/ml、24h时作用最强.用上述条件TGF-β1刺激心房、心室成纤维细胞,与对照组相比,心房成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,p-Smad2/3表达增加,Smad7表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05);心房成纤维细胞TGF-β1刺激组与心室成纤维细胞TGF-β1刺激组相比,两组Smad2/3的表达差异无统计学意义,但心房成纤维细胞TGF-β1刺激组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,p-Smad2/
作者：刘发金；肖骅；唐雪娇；张磊
来源：解放军医学杂志 2015 年 40卷 7期
