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目的:探讨热休克蛋白47(HSP47)对转化生长因子β1(TGF‐β1)刺激的肾小管上皮细胞(HK‐2)合成细胞外基质(ECM )的影响。方法以10 ng/mL TGF‐β1刺激 HK‐2细胞0、12、24、48 h ,蛋白印迹法检测HSP47的表达,蛋白印迹法及Real‐time聚合酶链反应(PCR)法检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达。然后转染HSP47小干扰RNA(siRNA)及阴性对照,后采用蛋白印迹法检测 HSP47的表达,蛋白印迹法及Real‐time PCR法检测ColⅠ和ColⅣ的表达。结果 TGF‐β1作用于HK‐2细胞后,HSP47蛋白呈时间依赖性表达上调(P<0.05),同时ColⅠ和ColⅣ蛋白及mRNA呈时间依赖性表达上调(P<0.05),转染 HSP47siRNA后,蛋白印迹法显示与对照组比,TGF‐β1组 HSP47表达增强(P<0.01),与 TGF‐β1组比,HSP47siRNA组 HSP47表达降低(P<0.01),对照组无明显变化(P>0.05),蛋白印记及Real‐time PCR结果显示,与对照组相比,TGF‐β1组ColⅠ和ColⅣ表达明显上调(P<0.01);与 TGF‐β1组相比,HSP47siRNA组ColⅠ和ColⅣ表达明显下调(P<0.05和 P<0.01);而 HSP47siRNA(-)组无明显的变化(P>0.05)。结论 HSP47可促进 HK‐2细胞ECM合成,抑制 HSP47可延缓肾间质纤维化疾病进展。

作者:毕慧欣;尹友生;李清初;李康慧;李小励;曾凝;韦家智

来源:山西医药杂志 2016 年 45卷 13期

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作者:
毕慧欣;尹友生;李清初;李康慧;李小励;曾凝;韦家智
来源:
山西医药杂志 2016 年 45卷 13期
标签:
热休克蛋白质47 转化生长因子β1 细胞外基质 胶原 Heat-shock proteins 47 Transforming growth factor beta 1 Extracellular matrix Colla-gen
目的:探讨热休克蛋白47(HSP47)对转化生长因子β1(TGF‐β1)刺激的肾小管上皮细胞(HK‐2)合成细胞外基质(ECM )的影响。方法以10 ng/mL TGF‐β1刺激 HK‐2细胞0、12、24、48 h ,蛋白印迹法检测HSP47的表达,蛋白印迹法及Real‐time聚合酶链反应(PCR)法检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达。然后转染HSP47小干扰RNA(siRNA)及阴性对照,后采用蛋白印迹法检测 HSP47的表达,蛋白印迹法及Real‐time PCR法检测ColⅠ和ColⅣ的表达。结果 TGF‐β1作用于HK‐2细胞后,HSP47蛋白呈时间依赖性表达上调(P<0.05),同时ColⅠ和ColⅣ蛋白及mRNA呈时间依赖性表达上调(P<0.05),转染 HSP47siRNA后,蛋白印迹法显示与对照组比,TGF‐β1组 HSP47表达增强(P<0.01),与 TGF‐β1组比,HSP47siRNA组 HSP47表达降低(P<0.01),对照组无明显变化(P>0.05),蛋白印记及Real‐time PCR结果显示,与对照组相比,TGF‐β1组ColⅠ和ColⅣ表达明显上调(P<0.01);与 TGF‐β1组相比,HSP47siRNA组ColⅠ和ColⅣ表达明显下调(P<0.05和 P<0.01);而 HSP47siRNA(-)组无明显的变化(P>0.05)。结论 HSP47可促进 HK‐2细胞ECM合成,抑制 HSP47可延缓肾间质纤维化疾病进展。