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目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧环境下c-kit+心脏干细胞凋亡的影响.方法 体外建立c-kit+心脏干细胞缺血缺氧模型,实验分为缺氧+CGRP组,缺氧+CGRP8-37(CGRP拮抗剂)组,细胞缺氧对照组,常氧细胞组,缺氧+BAY11-7282[核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂]组.采用免疫荧光检测细胞缺氧后NF-κB转位情况;采用Western blotting检测NF-κB通道蛋白的表达,同样方法检测CGRP干预后NF-κB转位及通道蛋白表达.同时用流式细胞仪检测CGRP干预后细胞凋亡率.结果 在缺氧状态下,NF-κB信号通路被激活,NF-κBP65发生核转位(呈现红色荧光).与细胞缺氧对照组比较,缺氧+CGRP组NF-κB相关信号蛋白P-I-κB、NF-κBP65及NF-κBP5.表达减少(P<0.05);与缺氧+CGRP 组比较,CGRP+CGRP8.37组上述NF-κB相关信号蛋白表达增加(P<0.0S).在细胞凋亡方面,与缺氧对照组比较,缺氧+CGRP组早、晚期细胞凋亡率均降低(P<0.05);与缺氧+CGRP组比较,缺氧+CGRP8-37组细胞早期凋亡增加(P<0.0S).结论 CGRP在调节NF-κB信号的同时抑制了缺氧环境下c-kit+心脏干细胞的凋亡.

作者:龙仙萍;郑小宇;王冬梅;许官学;赵然尊;石蓓

来源:解放军医学杂志 2015 年 40卷 10期

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龙仙萍;郑小宇;王冬梅;许官学;赵然尊;石蓓
来源:
解放军医学杂志 2015 年 40卷 10期
标签:
降钙素基因相关肽 NF-κB 缺氧 c-kit+心脏干细胞 细胞凋亡 calcitonin gene-related peptide nuclear factor kappa B anoxia c-kit+ cardiac stem cells apoptosis
目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧环境下c-kit+心脏干细胞凋亡的影响.方法 体外建立c-kit+心脏干细胞缺血缺氧模型,实验分为缺氧+CGRP组,缺氧+CGRP8-37(CGRP拮抗剂)组,细胞缺氧对照组,常氧细胞组,缺氧+BAY11-7282[核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂]组.采用免疫荧光检测细胞缺氧后NF-κB转位情况;采用Western blotting检测NF-κB通道蛋白的表达,同样方法检测CGRP干预后NF-κB转位及通道蛋白表达.同时用流式细胞仪检测CGRP干预后细胞凋亡率.结果 在缺氧状态下,NF-κB信号通路被激活,NF-κBP65发生核转位(呈现红色荧光).与细胞缺氧对照组比较,缺氧+CGRP组NF-κB相关信号蛋白P-I-κB、NF-κBP65及NF-κBP5.表达减少(P<0.05);与缺氧+CGRP 组比较,CGRP+CGRP8.37组上述NF-κB相关信号蛋白表达增加(P<0.0S).在细胞凋亡方面,与缺氧对照组比较,缺氧+CGRP组早、晚期细胞凋亡率均降低(P<0.05);与缺氧+CGRP组比较,缺氧+CGRP8-37组细胞早期凋亡增加(P<0.0S).结论 CGRP在调节NF-κB信号的同时抑制了缺氧环境下c-kit+心脏干细胞的凋亡.