目的 探讨体外心肌细胞间接接触共培养诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的效果,以寻找最佳的诱导条件.方法 2～3周龄SD大鼠24只和新生1～ 3d SD大鼠96只.分别通过全骨髓贴壁筛选法和差速贴壁法获取BMSCs和心肌细胞(CMs).根据诱导条件不同分成3组:A组:5-氮杂胞苷(5-Aza-CR)诱导组,取采用10μmol/L 5-Aza-CR避光诱导24h;B组:共培养CMs诱导组,实验开始时,CMs和BMSCs分开培养,待各自贴壁后进行共培养;C组:5-Aza-CR+共培养CMs诱导组,CMs接种于Transwell小室上层,下层接种5-Aza-CR诱导的BMSCs.在相差显微镜下连续观察各组BMSCs的形态变化,诱导至第2、4周时收集细胞.应用免疫组织化学法和免疫荧光方法检测诱导后的BMSCs α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况.结果 1.细胞形态的变化:B组细胞有聚集生长趋势,C组脱落或降解的细胞明显少于A组,但部分细胞内有脂肪空泡形成.2.免疫组织化学和免疫荧光检测结果均显示,诱导2周时,A、B、C组cTnT均呈阴性或低表达,α-actin均呈弱表达;诱导4周时各组cTnT和α-actin均呈阳性表达.A组cTnT阳性表达率和α-actin阳性表达率分别为(20.22±2.30)％和(28.05±2.45)％、B组为(21.18 ±1.30)％和(29.06±1.86)％、C组为(26.28±2.89)％和(33.91

作者：郭义威；毛光兰；范艳芬；王庆志；闫建国；李娜娜；王志勇

来源：解剖学报 2015 年 46卷 3期