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目的 探讨微小RNA-145 (miR-145)参与乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的机制.方法 体外培养永生化乳腺癌细胞系MCF-7细胞,并转染miR-145.分别应用Real-time PCR与Western blotting检测mRNA和蛋白水平.细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增殖水平,流式细胞术检测不同处理组MCF-7细胞的凋亡水平.结果 Real-time PCR结果表明,高表达miR-145对MCF-7细胞Caspase-3、增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的mRNA水平并无影响;而Western blotting实验结果表明,与对照组相比,转染miR-145 96 h可显著提高Caspase-3的表达,并抑制PCNA与Bcl-2的表达.CCK-8实验结果表明,过表达miR-145 72 h、96 h后MCF-7细胞增殖率降低,差异具有统计学意义(P<0.05).流式细胞术结果表明,过表达组MCF-7细胞的凋亡率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 miR-145可通过下调PCNA与Bcl-2蛋白、上调Caspase-3蛋白的表达,从而抑制MCF-7细胞增殖和促进MCF-7细胞凋亡,有望成为乳腺癌治疗的新靶点.

作者:齐玉林;韩慧芳;张海新

来源:解剖学报 2020 年 51卷 1期

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作者:
齐玉林;韩慧芳;张海新
来源:
解剖学报 2020 年 51卷 1期
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乳腺癌 MCF-7细胞系 微小RNA-145 细胞增殖 免疫印迹法 人
目的 探讨微小RNA-145 (miR-145)参与乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的机制.方法 体外培养永生化乳腺癌细胞系MCF-7细胞,并转染miR-145.分别应用Real-time PCR与Western blotting检测mRNA和蛋白水平.细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增殖水平,流式细胞术检测不同处理组MCF-7细胞的凋亡水平.结果 Real-time PCR结果表明,高表达miR-145对MCF-7细胞Caspase-3、增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的mRNA水平并无影响;而Western blotting实验结果表明,与对照组相比,转染miR-145 96 h可显著提高Caspase-3的表达,并抑制PCNA与Bcl-2的表达.CCK-8实验结果表明,过表达miR-145 72 h、96 h后MCF-7细胞增殖率降低,差异具有统计学意义(P<0.05).流式细胞术结果表明,过表达组MCF-7细胞的凋亡率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 miR-145可通过下调PCNA与Bcl-2蛋白、上调Caspase-3蛋白的表达,从而抑制MCF-7细胞增殖和促进MCF-7细胞凋亡,有望成为乳腺癌治疗的新靶点.