目的 检测胆固醇对ob/ob肥胖小鼠神经干细胞(NSCs)增殖和分化能力的影响,探讨肥胖引起中枢神经系统功能障碍的可能机制.方法 选取4月龄ob/ob和野生型(WT)小鼠各6只,运用细胞增殖抗原(Ki67)和双皮质素(DCX)免疫荧光染色检测ob/ob小鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)神经发生水平;分离培养18只4月龄ob/ob和WT小鼠SVZ的NSCs,运用BrdU掺入实验和β..Ⅲ-微管蛋白(Tuj1)免疫荧光染色检测NSCs的自我更新和分化能力.运用基质辅助激光解飞行时间质谱(MALDI-MS)分别检测3只ob/ob和WT小鼠脑组织的脂质分布,并分析胆固醇(ST)含量和胆固醇合成相关基因的表达变化.体外培养15只WT新生鼠(PO)SVZ的NSCs,并通过电穿孔法转染胆固醇合成限速酶3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A还原酶(Hmgcr)的小干扰RNA(siRNA),验证敲减效率,并通过BrdU掺入实验和Tuj1免疫荧光染色检测Hmgcr基因敲减对NSCs的影响.结果 与WT小鼠相比,ob/ob小鼠SVZ部位Ki67+和DCX+细胞数量均显著下降(P<0.05).体外实验结果显示,ob/ob小鼠NSCs的BrdU阳性率(P<0.05)和Tuj1阳性率(P<0.05)较WT小鼠NSCs显著下降.MALDI-MS结果显示,在ob/ob小鼠SVZ部位,ST(26:0)和ST(27:3)分布较WT小鼠明显减少;同样,试剂盒检测结果显示,与WT小鼠相比,ob/ob小鼠SVZ组织及NSCs的胆固醇含量显著降低(
作者:李瑞婷;雷凌峰;杨娜;向治俞;李泽锴;陆利
来源:解剖学报 2023 年 54卷 2期