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目的:观察足细胞血栓素A2受体(Tbxa2r)基因敲低对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)诱导的足细胞凋亡的影响.方法:通过目标序列设计4条siRNA,评价细胞转染效率后,RT-PCR检测siRNA干扰效果,蛋白质印迹法检测Tbxa2r蛋白表达,流式细胞仪检测PAN诱导的MPC5足细胞的凋亡情况.结果:目标序列在转染24 h后几乎没有干扰效果,而在48h时第3条siRNA(Tbxa2r-mus-1677)干扰序列作用效果最好;在干扰72h后,Tbxa2r蛋白表达量明显降低.PAN刺激48h后,空白组与阴性对照组MPC5足细胞没有明显的凋亡现象,阳性对照组与Tbxa2r基因敲低PAN组细胞凋亡和坏死现象明显.结论:PAN能促进Tbxa2r基因敲低的足细胞发生凋亡和坏死.

作者:邓振兴;孔维信;张林;孙怀鑫;丁露露

来源:江苏大学学报(医学版) 2014 年 24卷 5期

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作者:
邓振兴;孔维信;张林;孙怀鑫;丁露露
来源:
江苏大学学报(医学版) 2014 年 24卷 5期
标签:
足细胞 血栓素A2受体 细胞凋亡 podocyte Tbxa2r cell apoptosis
目的:观察足细胞血栓素A2受体(Tbxa2r)基因敲低对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)诱导的足细胞凋亡的影响.方法:通过目标序列设计4条siRNA,评价细胞转染效率后,RT-PCR检测siRNA干扰效果,蛋白质印迹法检测Tbxa2r蛋白表达,流式细胞仪检测PAN诱导的MPC5足细胞的凋亡情况.结果:目标序列在转染24 h后几乎没有干扰效果,而在48h时第3条siRNA(Tbxa2r-mus-1677)干扰序列作用效果最好;在干扰72h后,Tbxa2r蛋白表达量明显降低.PAN刺激48h后,空白组与阴性对照组MPC5足细胞没有明显的凋亡现象,阳性对照组与Tbxa2r基因敲低PAN组细胞凋亡和坏死现象明显.结论:PAN能促进Tbxa2r基因敲低的足细胞发生凋亡和坏死.