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目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)是否能诱导小鼠足细胞株凋亡以及诱导凋亡的途径。方法(1)体外培养小鼠足细胞株;(2)应用不同浓度(10-1~104ng/L)TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡;(3)103ng/L TGF-β1诱导不同时间(12、24、48h)后观察足细胞凋亡情况;(4)采用流式细胞仪检测Annexin V、Caspase 3;(5)实时定量PCR及Western印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、Smad2、Smad3、Smad7mRNA及蛋白质的表达情况。结果(1)小鼠足细胞在不同浓度(10-1~104ng/L) TGF-β1刺激下,细胞凋亡率明显高于正常对照组(均P<0.05);(2)随着TGF-β1浓度增加、凋亡时间增加,足细胞凋亡率增高(P<0.05);p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达增加;TGF-β1103ng/L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间;(3)与正常对照组比较,103ng/LTGF-β1诱导后Caspase 3阳性细胞比率显著增加(P<0.01),p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7蛋白质表达亦显著增加(P<0.01)。结论 TGF-β1能诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。TGF-β1通过Smad通路、p38MAPK通路以及线粒体通路诱导小鼠足细胞凋亡。

作者:王宇晖;童孟立;杨汝春

来源:浙江医学 2013 年 19期

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作者:
王宇晖;童孟立;杨汝春
来源:
浙江医学 2013 年 19期
标签:
TGF-β1 足细胞 凋亡 TGF- β1 Podocyte Apoptosis
目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)是否能诱导小鼠足细胞株凋亡以及诱导凋亡的途径。方法(1)体外培养小鼠足细胞株;(2)应用不同浓度(10-1~104ng/L)TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡;(3)103ng/L TGF-β1诱导不同时间(12、24、48h)后观察足细胞凋亡情况;(4)采用流式细胞仪检测Annexin V、Caspase 3;(5)实时定量PCR及Western印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、Smad2、Smad3、Smad7mRNA及蛋白质的表达情况。结果(1)小鼠足细胞在不同浓度(10-1~104ng/L) TGF-β1刺激下,细胞凋亡率明显高于正常对照组(均P<0.05);(2)随着TGF-β1浓度增加、凋亡时间增加,足细胞凋亡率增高(P<0.05);p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达增加;TGF-β1103ng/L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间;(3)与正常对照组比较,103ng/LTGF-β1诱导后Caspase 3阳性细胞比率显著增加(P<0.01),p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7蛋白质表达亦显著增加(P<0.01)。结论 TGF-β1能诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。TGF-β1通过Smad通路、p38MAPK通路以及线粒体通路诱导小鼠足细胞凋亡。