目的:研究TGF-β1在黑色素瘤细胞中的作用,为可能的黑色素瘤分子靶向治疗提供理论依据.方法:分别收集黑色素瘤病人与正常人血清,去除IgG、白蛋白等高丰度蛋白,液相分离后质谱检测,筛选血清差异蛋白.筛选出TGF-β1后进行ELISA验证.进一步构建TGF-β1稳定高表达的黑色素瘤细胞(A-375及SK-MEL-1),利用荧光定量PCR和Western blot进行验证.采用PI-AnnexinV双染及流式细胞术分析TGF-β1高表达对黑色素瘤细胞凋亡的影响.结果:与正常人血清对照组比较,共鉴定了84个黑色素瘤相关的血清差异蛋白,其中33个蛋白上调,49个蛋白下调(TGF-β1明显下调),ELISA结果验证了TGF-β1在黑色素瘤病人血清中表达水平相对于健康对照下调2.3倍(P＜0.05).荧光定量PCR和Western blot验证显示构建的TGF-β1稳定高表达的黑色素瘤细胞A-375及SK-MEL-1中TGF-β1 mRNA和蛋白均较对照A-375及SK-MEL-1细胞明显升高(P＜0.05或P＜0.01);与正常对照组细胞比较,TGF-β1高表达时A-375及SK-MEL-1细胞凋亡率均升高(P均＜0.01).结论:TGF-β1在黑色素瘤病人中表达水平显著降低,当其表达水平升高时可诱导黑色素瘤细胞凋亡,提示TGF-β1可能作为黑色素瘤治疗的潜在靶分子.
作者：周启明；李巍；袁建辉；赵艳；段江曼；熊东林
来源：癌变·畸变·突变 2016 年 28卷 5期
