目的:探讨θ型蛋白激酶C(PKCθ)/Munc18a信号途径介导的脓毒症时血小板α颗粒释放及外源性一氧化碳释放分子Ⅱ(CO-releasing molecules-2,CORM-2)的干预机制.方法:采集健康成年人肘静脉血,差速离心法分离出血小板,随机分为正常对照组,脂多糖刺激组,无活性的CORM-2(iCORM-2,50 μmol/L)组,CORM-2(10 μmol/L)组,CORM-2(50 μmol/L)组.为进一步探讨PKCθ的功能,设立脂多糖+AEB071组和脂多糖+CORM-2(50 μmol/L)+AEB071组接受PKCθ抑制剂AEB071(50 nmoL/L)干预.随后采用ELISA法检测各组血小板α颗粒释放的血小板源性生长因子BB(platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)和MMP-2,流式细胞术检测血小板P-选择素的表达;免疫荧光法检测血小板α颗粒的分布;同时用蛋白质印迹法检测血小板关键信号分子PKCθ和Munc1 8a的活性.结果:CORM-2(10、50μmol/L)干预能够有效抑制脂多糖刺激后血小板P-选择素、PDGF-BB和MMP-2的释放(均P＜0.05).免疫荧光检测结果显示CORM-2能抑制脂多糖刺激后血小板α颗粒的释放.脂多糖刺激后血小板PKCθ和Munc18a的磷酸化水平在AEB071组与CORM-2(50 μmol/L)组均明显降低(均P＜0.05).结论:CORM-2的干预能够有效地抑制脓毒症时血小板α颗粒的异常释放,其机制可能涉及PKCθ/Munc 18a信号途

作者：庄明峰；徐晓涵；刘大东；宋明明；王旭；秦魏婷；孙炳伟

来源：江苏大学学报（医学版） 2016 年 26卷 1期