目的:探讨 miR-34a 对人卵巢颗粒细胞的作用及其机制。方法:体外培养人卵泡颗粒细胞,分为模拟物转染组、抑制物转染组、模拟物阴性对照转染组、抑制物阴性对照转染组,分别转染 miR-34a 模拟物、miR-34a 抑制物、模拟物阴性对照和抑制物阴性对照,另设空白对照组不做任何处理;实时定量荧光 PCR(qRT-PCR)检测各组细胞 miR-34a、Bcl-2、Bax、生存素、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)的 mRNA 表达水平,蛋白质印迹法检测 Bcl-2、Bax、生存素、Caspase-3、剪切体 Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:miR-34a 模拟物转染明显下调 Bcl-2 mRNA 表达水平,降低 Bcl-2、生存素蛋白表达,并增加 Bax、Caspase-3蛋白表达,促进人颗粒细胞凋亡;miR-34a 抑制物转染作用则与之相反;然而,miR-34a 模拟物和抑制物转染对 Bax、生存素、Caspase-3的 mRNA水平均无明显影响。结论:miR-34a 可通过调控凋亡相关的蛋白与基因的表达,促进人颗粒细胞凋亡。
作者:朱小兰;陈小芳;许文林
来源:江苏大学学报(医学版) 2016 年 26卷 6期