目的 探讨miR-224通过调控同源异型盒基因B3(HoxB3)表达对大肠癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 采用RT-PCR法检测miR-224在大肠癌细胞株及人正常结肠直肠黏膜上皮细胞HIEC中的表达,大肠癌细胞转染miR-224 inhibitor,并通过双荧光素酶实验、Western blot及RT-PCR证实HoxB3是miR-224的靶基因.MTT及AnnexinV-PI法检测miR-224及HoxB3表达量下调后分别对大肠癌细胞活力的影响.流式细胞术检测miR-224 inhibitor对大肠癌细胞周期的影响;Western blot检测miR-224 inhibitor对大肠癌细胞中细胞分裂周期相关蛋白3(CDCA 3)、细胞周期蛋白D1(CyclinD 1)、p21及p27表达的影响.结果 大肠癌细胞中miR-224表达量高于人正常结肠直肠黏膜上皮细胞HIEC,且HCT 116中的表达量最高,因此选为后续细胞株.双荧光素酶报告基因证实HoxB3是miR-224下游靶基因,Western blot及RT-PCR结果证实下调miR-244的表达水平后HoxB3蛋白及mRNA表达量均显著下降(P＜0.01).下调miR-224及干扰HoxB3表达都能显著降低HCT116细胞活力(P＜0.01),促进细胞凋亡(P＜0.01).下调miR-224还能使HCT116细胞周期阻滞在G1期,抑制CDCA3及CyclinD1表达(P＜0.01),促进p21及p27表达(P＜0.01).结论 miR-224在大肠癌细胞中高表达,并能通过调控靶基因HoxB3的表达及调节细胞周

作者：李青春；薛军花；李文革；邢国强

来源：实用临床医药杂志 2018 年 22卷 17期