目的 探讨长链非编码RNA HOTAIR对人胃腺癌细胞(AGS)增殖、凋亡的影响.方法 买时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测正常胃上皮细胞(GES-1)与胃癌AGS细胞中HOTAIR的表达水平,以及si-RNA HOTAIR(si-HOTAIR)转染胃癌AGS细胞后HOTAIR及微小RNA-206(miR-206)的表达水平.生物信息学预测HOTAIR与miR-206的结合位点,荧光素酶报告实验验证二者靶向关系.将细胞分为对照组、si-HOTAIR组、si-HOTAIR+ miR-206抑制剂组,采用CCK-8、平板克隆形成实验检测各组细胞的活性和增殖能力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平,免疫印迹实验检测相关抗凋亡蛋白CDK9的表达水平.结果 与正常人胃黏膜上皮GES-1细胞相比,AGS细胞中HOTAIR的表达量显著增高(P<0.001),miR-206的表达水平显著降低(P<0.01).转染si-HOTAIR的AGS细胞中HOTAIR表达量显著降低(P<0.01),miR-206表达水平显著增高(P<0.01).实验结果显示,miR-206模拟物(miR-206 mimics)能显著降低野生型HOTAIR质粒的荧光素酶活性(P<0.01).与对照组相比,si-HOTAIR组细胞增殖能力显著降低,凋亡能力显著提高(P<0.001);与si-HOTAIR组相比,si-HOTAIR+miR-206抑制剂组细胞增殖能力显著增高,凋亡能力显著降低(P<0.01).实验结果显示,si-HOTAIR能显著降低CDK9的蛋白水平表达,miR-206抑制
作者:周贤静;柳秀芳;李亚轩;李皓;戴晓荣;黄震;唐娟;成宏伟
来源:实用临床医药杂志 2020 年 24卷 8期