目的 探讨高糖刺激对大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)的潜在影响.方法 采用5.5、30.0 mmol/L葡萄糖处理RMCs,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PINK1和Parkin mRNA水平;采用蛋白免疫印迹法检测PINK1、Parkin、线粒体外膜转位酶20(Tomm20)和LC3-Ⅱ蛋白水平;采用免疫荧光技术检测LC3-Ⅱ与Tomm20的共定位;采用流式细胞术测定RMCs中活性氧(ROS)水平和凋亡情况;采用酶联免疫吸附试验和RT-qPCR检测炎症因子的释放情况;应用蛋白免疫印迹法检测核因子κB (NF-κB)通路的调节作用.结果 经30.0 mmol/L葡萄糖处理后,在RMCs中发现了PINK1和Parkin mRNA呈低表达,PINK1和Parkin蛋白水平也降低;同时,RMCs中LC3-Ⅱ和Tomm20蛋白水平升高,而Tomm20和LC3-Ⅱ的共表达信号显著减少.经30.0 mmol/L葡萄糖处理后,RMCs中ROS水平、凋亡率和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)的浓度与mRNA水平均升高.在30.0 mmol/L葡萄糖处理的RMCs中,NF-κB通路被激活.结论 高糖刺激促进ROS的产生和炎症反应,同时也抑制了RMCs中的PINK1/Parkin信号通路.高糖刺激能够通过调节PINK1/Parkin介导的线粒体自噬途径影响糖尿病肾病(DN)的进展.
作者:彭园;盛笑;叶新华;于文龙;薛云;成金罗
来源:实用临床医药杂志 2021 年 25卷 20期