目的：研究含登革2型病毒43株（D2-43）NS1基因的重组质粒DNA在幼地鼠肾细胞BHK-21的表达。方法：将含信号肽的NS1基因片段插入到pcDNA3.1的KpnⅠ位点和EcoRⅠ位点之间，获得重组表达载体pcDNA-NS1。用电穿孔法将其导入BHK-21细胞，G418选择培养。挑取单细胞克隆，RT-PCR及蛋白质印迹法鉴定NS1基因的稳定表达。结果：在随机挑取的5个单细胞克隆中，有4个克隆的RT-PCR鉴定为阳性，蛋白质印迹结果表明NS1基因获得表达。结论：构建的pcDNA-NS1质粒在BHK-21细胞中有稳定表达，因此含NS1基因的该重组质粒DNA可用作核酸免疫。
作者：胡志君；杨敬；赵卫；杨佩英；秦鄂德；范宝昌；耿丽卿；于曼
来源：军事医学科学院院刊 2001 年 25卷 1期
