登革病毒(Dengue virus,DENV)是全球传播最为广泛的虫媒病毒,由于缺乏快速鉴别感染病毒血清型的诊断技术,导致异型交叉感染引起重症登革出血热病例居高不下.为实现免疫学方法快速鉴别诊断不同血清型DENV感染,本研究采用哺乳动物细胞293T表达并纯化了4种DENV血清型NS1蛋白,免疫小鼠后通过杂交瘤技术制备了针对NS1蛋白的单克隆抗体.利用酶联免疫吸附方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence assay,IFA)、免疫斑点杂交试验(Dot blotting)以及蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)确认所制备的单克隆抗体能够有效识别天然病毒NS1以及重组NS1蛋白.获得的单克隆抗体包含2株可识别1-4型DENV NS1蛋白的通用型抗体及3株分别针对DENV-1、DENV-2和DENV-4的血清型特异抗体.以所制备的DENV NS1抗体为基础,采用双抗体夹心ELISA可快速鉴别不同血清型DENV.DENV血清型特异单克隆抗体的制备和甄别DENV血清型ELISA方法的建立为快速鉴别感染DENV血清型的临床诊断奠定了基础.
作者：刘杨；张元；魏艳秋；贾晓娟；陈启军；刘文军；杨利敏
来源：生物工程学报 2020 年 36卷 10期
