目的:检测石蜡包埋组织中的HCV RNA.方法:原位PCR是一种能够检测单拷贝、低拷贝(20bp)DNA或RNA序列的新技术,本研究应用原位逆转录PCR检测石蜡包埋人肝外胆管癌组织中的HCV RNA.结果和结论:(1)基因组DNA去除一定要彻底.(2)选择合适的逆转录酶.(3)用原位PCR仪专用的封片装置封好,以防扩增液流出.(4)无水乙醇后固定10*!min防止扩增产物扩散.(5)对于不同组织来源的DNA或RNA进行原位PCR扩增的次数不同,不是循环次数越多越好,次数增多有可能使扩增产物从细胞内溢出,增加非特异性.
作者：高亚兵；彭瑞云；陈明易；谷庆阳；王德文
来源：军事医学科学院院刊 2002 年 26卷 2期
