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目的:建立共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的哺乳动物细胞表达系统.方法:采用脂质体介导的方法,将编码大鼠μ阿片受体和人咪唑啉-1受体的基因导入CHO细胞中,以放射配体-受体结合试验分析受体的表达水平,用cAMP积累试验分析表达受体的功能.结果:在共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的CHO细胞中,表达的μ阿片受体对3H-二丙诺啡(diprenorphine)的Kd和Bmax值分别为(0.24 ± 0.02)nmol/L和(1.83±0.13)pmol/mg蛋白;表达的咪唑啉-1受体对3H-可乐定的Kd和Bmax值分别为(3.72±0.25)nmol/L和(43.59±6.83)fmol/106细胞.表达的μ阿片受体抑制福司科林(forskolin)刺激下cAMP的积累,表达的咪唑啉-1受体抑制吗啡慢性处理、纳洛酮催促引起的cAMP超射.结论:首次建立了共同稳定表达μ阿片受体和咪唑啉-1受体的细胞模型.

作者:吴宁;苏瑞斌;徐波;李锦;秦伯益

来源:军事医学科学院院刊 2004 年 28卷 4期

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作者:
吴宁;苏瑞斌;徐波;李锦;秦伯益
来源:
军事医学科学院院刊 2004 年 28卷 4期
标签:
CHO细胞 人咪唑啉-1受体 阿片样受体 大鼠
目的:建立共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的哺乳动物细胞表达系统.方法:采用脂质体介导的方法,将编码大鼠μ阿片受体和人咪唑啉-1受体的基因导入CHO细胞中,以放射配体-受体结合试验分析受体的表达水平,用cAMP积累试验分析表达受体的功能.结果:在共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的CHO细胞中,表达的μ阿片受体对3H-二丙诺啡(diprenorphine)的Kd和Bmax值分别为(0.24 ± 0.02)nmol/L和(1.83±0.13)pmol/mg蛋白;表达的咪唑啉-1受体对3H-可乐定的Kd和Bmax值分别为(3.72±0.25)nmol/L和(43.59±6.83)fmol/106细胞.表达的μ阿片受体抑制福司科林(forskolin)刺激下cAMP的积累,表达的咪唑啉-1受体抑制吗啡慢性处理、纳洛酮催促引起的cAMP超射.结论:首次建立了共同稳定表达μ阿片受体和咪唑啉-1受体的细胞模型.