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目的:在巴斯德毕赤酵母中进行表达及纯化AT-Ⅲ,以对其功能进行深入研究.方法:将携带AT-Ⅲ基因的表达载体电转染GS115细胞,用G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE与Western印迹检测及鉴定表达产物;采用生化法测定AT-Ⅲ的表达量;利用凝血酶空斑法测定表达产物活性,经过Heparin-hyperD柱纯化.结果:Western 印迹分析发现转移至膜上的表达产物能与抗AT-Ⅲ单克隆抗体结合,证明成功地表达了AT-Ⅲ,纯度>95

作者:于群;贺敏;宋丽雅;卜凤荣;王全立

来源:军事医学科学院院刊 2004 年 28卷 4期

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作者:
于群;贺敏;宋丽雅;卜凤荣;王全立
来源:
军事医学科学院院刊 2004 年 28卷 4期
标签:
抗凝血酶Ⅲ 毕赤酵母 基因表达
目的:在巴斯德毕赤酵母中进行表达及纯化AT-Ⅲ,以对其功能进行深入研究.方法:将携带AT-Ⅲ基因的表达载体电转染GS115细胞,用G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE与Western印迹检测及鉴定表达产物;采用生化法测定AT-Ⅲ的表达量;利用凝血酶空斑法测定表达产物活性,经过Heparin-hyperD柱纯化.结果:Western 印迹分析发现转移至膜上的表达产物能与抗AT-Ⅲ单克隆抗体结合,证明成功地表达了AT-Ⅲ,纯度>95