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目的 探讨泛素连接酶Smad泛素化相关因子2(Smad ubiquitination-related factor 2,Smurf2)Nedd化修饰的机制.方法 梯度过表达Nedd8检测Smurf2的蛋白水平变化,免疫共沉淀(IP)和Western印迹分析Smurf2的Nedd化修饰,GST融合蛋白沉降技术(GST-pulldown)验证相互作用,分析Smurf1 C426A基因敲入(knock in)小鼠体内Smurf2在淋巴、脾、肝和肺组织的蛋白表达水平.结果 Smurf2可发生Nedd化修饰,过表达Nedd8可导致Smurf2蛋白水平下调,Smurf1和Smurf2能相互作用,且Smurf1可使Smurf2的Nedd化修饰增强.在Smurf1 C426A基因敲入小鼠的组织细胞中Smurf2蛋白水平上调.结论 Smurf1能促进Smurf2的Nedd化修饰.

作者:刘超;李海文;韦荣飞;谢萍;张令强

来源:军事医学 2017 年 41卷 2期

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作者:
刘超;李海文;韦荣飞;谢萍;张令强
来源:
军事医学 2017 年 41卷 2期
标签:
泛素蛋白连接酶类 泛素 免疫沉淀法 Smurf1 Smurf2 Nedd8 nedd化 ubiquitin-protein ligases ubiquitin immunoprecipitation Smurf1 Smurf2 Nedd8 neddylation
目的 探讨泛素连接酶Smad泛素化相关因子2(Smad ubiquitination-related factor 2,Smurf2)Nedd化修饰的机制.方法 梯度过表达Nedd8检测Smurf2的蛋白水平变化,免疫共沉淀(IP)和Western印迹分析Smurf2的Nedd化修饰,GST融合蛋白沉降技术(GST-pulldown)验证相互作用,分析Smurf1 C426A基因敲入(knock in)小鼠体内Smurf2在淋巴、脾、肝和肺组织的蛋白表达水平.结果 Smurf2可发生Nedd化修饰,过表达Nedd8可导致Smurf2蛋白水平下调,Smurf1和Smurf2能相互作用,且Smurf1可使Smurf2的Nedd化修饰增强.在Smurf1 C426A基因敲入小鼠的组织细胞中Smurf2蛋白水平上调.结论 Smurf1能促进Smurf2的Nedd化修饰.