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目的 用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测不同亚型干扰素α(IFN-α 2b、IFN-α2a、IFN-α1b)对HepG2细胞内信号传导分子STAT1 mRNA表达的影响.方法 1000IU/mlIFN-α2b、IFN-α2a、IFN-α 1b分别作用于HepG2细胞4、8、16、24 h后,用RT-PCR的方法扩增STAT1目的片段,用T-A克隆方法构建定量的标准模板,并用荧光定量PCR方法 观察IFN-α2b、IFN-α2a、IFN-α 1b作用后HepG2细胞内STAT1 mRNA的表达水平.结果 经IFN-α 2b、IFN-α2a、IFN-α1b处理后,HepG2细胞内的STAT1 mRNA水平较未用IFN-α的空白对照组明显上调,并于IFN-α处理8 h后STAT1 mRNA水平达高峰.此时,IFN-α 2b、IFN-α 2a和IFN-α 1b的STAT1 mRNA水平(×107 copies/ml)依次为3.59±0.25、2.73±0.43和4.85±0.55,三者之间存在显著性差异.结论 IFN-α作用于HepG2细胞后,IFN-α1b STAT1 mRNA的表达水平最高,IFN-α 2b次之,IFN-α 2a最弱.间接说明IFN-α 1b的抗HBV活性较强,IFN-α 2b次之,IFN-α 2a较弱.

作者:卢年芳;郑瑞强;林华;黄爱龙;杨德刚

来源:江苏医药 2006 年 32卷 10期

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作者:
卢年芳;郑瑞强;林华;黄爱龙;杨德刚
来源:
江苏医药 2006 年 32卷 10期
标签:
干扰素-α 荧光定量聚合酶链反应 基因重组
目的 用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测不同亚型干扰素α(IFN-α 2b、IFN-α2a、IFN-α1b)对HepG2细胞内信号传导分子STAT1 mRNA表达的影响.方法 1000IU/mlIFN-α2b、IFN-α2a、IFN-α 1b分别作用于HepG2细胞4、8、16、24 h后,用RT-PCR的方法扩增STAT1目的片段,用T-A克隆方法构建定量的标准模板,并用荧光定量PCR方法 观察IFN-α2b、IFN-α2a、IFN-α 1b作用后HepG2细胞内STAT1 mRNA的表达水平.结果 经IFN-α 2b、IFN-α2a、IFN-α1b处理后,HepG2细胞内的STAT1 mRNA水平较未用IFN-α的空白对照组明显上调,并于IFN-α处理8 h后STAT1 mRNA水平达高峰.此时,IFN-α 2b、IFN-α 2a和IFN-α 1b的STAT1 mRNA水平(×107 copies/ml)依次为3.59±0.25、2.73±0.43和4.85±0.55,三者之间存在显著性差异.结论 IFN-α作用于HepG2细胞后,IFN-α1b STAT1 mRNA的表达水平最高,IFN-α 2b次之,IFN-α 2a最弱.间接说明IFN-α 1b的抗HBV活性较强,IFN-α 2b次之,IFN-α 2a较弱.