疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达-临床诊疗知识库

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作者：

郑艳；周波；宋宁宁；李多川

来源：

菌物学报 2009 年 28卷 2期

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内含子成熟蛋白诱导分泌表达重组酶最适反应温度最适反应pH 热稳定

疏棉状嗜热丝孢菌Thermomyces lanuginosus可产生具有重要工业生产价值的脂肪酶.根据已报道的相应序列设计特异引物,综合运用PCR、RT-PCR技术克隆到脂肪酶基因的全长DNA和cDNA序列.其中DNA序列长1071bp,包含876bp的开放阅读框以及3段内含子;cDNA序列长885bp.结构基因编码蛋白包含292个氨基酸,前17个氨基酸构成信号肽.序列提交GenBank,登录号分别为EU022703和EU370914.将脂肪酶基因cDNA序列的开放阅读框克隆到酵母分泌型表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115得到重组子且实现了分泌表达.将重组子诱导产酶,在培养温度30℃、甲醇添加量1

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