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漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,其作用底物范围广,在食品、能源和环保等领域具有重要的应用价值,因此筛选高产漆酶菌株对于其工业应用具有重要意义.本实验以78株香菇菌株为实验材料,利用愈创木酚平板法初筛,液体发酵复筛的方法筛选高产漆酶香菇菌株,并通过实时定量PCR分析香菇漆酶同工酶在不同菌株之间转录表达的差异性和特异性.结果表明,不同香菇菌株的生长速度、变色圈大小存在差异,以菌丝圈和变色圈大小及其比例为依据,从78株香菇菌株中筛选出19株潜在的漆酶高产菌株;液体发酵从这19株菌株中复筛出3株高产漆酶的菌株:香240、15和冕宁浅灰,其中香240在培养第3天酶活达到最高(3.583U/mL),香15和冕宁浅灰则在培养第7天酶活达到最高(分别为3.842U/mL和2.806U/mL);实时荧光定量PCR结果显示,10个漆酶同工酶基因在两株香菇菌株中的表达存在差异性和特异性,其中Lelac5和Lelac9只在菌株香240中检测到转录本;Lelac1-4在菌株15中表达量较高,而Lelac8、Lelac10和Lelac11在香240中的表达量较高.研究结果将为香菇漆酶的进一步研究提供基础.

作者:秦澎;辜运富;曾先富;向泉桔

来源:菌物学报 2017 年 36卷 9期

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作者:
秦澎;辜运富;曾先富;向泉桔
来源:
菌物学报 2017 年 36卷 9期
标签:
平板筛选 同工酶 实时荧光定量PCR 表达量 plate screening isozyme real-time quantitative PCR expression profiles
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,其作用底物范围广,在食品、能源和环保等领域具有重要的应用价值,因此筛选高产漆酶菌株对于其工业应用具有重要意义.本实验以78株香菇菌株为实验材料,利用愈创木酚平板法初筛,液体发酵复筛的方法筛选高产漆酶香菇菌株,并通过实时定量PCR分析香菇漆酶同工酶在不同菌株之间转录表达的差异性和特异性.结果表明,不同香菇菌株的生长速度、变色圈大小存在差异,以菌丝圈和变色圈大小及其比例为依据,从78株香菇菌株中筛选出19株潜在的漆酶高产菌株;液体发酵从这19株菌株中复筛出3株高产漆酶的菌株:香240、15和冕宁浅灰,其中香240在培养第3天酶活达到最高(3.583U/mL),香15和冕宁浅灰则在培养第7天酶活达到最高(分别为3.842U/mL和2.806U/mL);实时荧光定量PCR结果显示,10个漆酶同工酶基因在两株香菇菌株中的表达存在差异性和特异性,其中Lelac5和Lelac9只在菌株香240中检测到转录本;Lelac1-4在菌株15中表达量较高,而Lelac8、Lelac10和Lelac11在香240中的表达量较高.研究结果将为香菇漆酶的进一步研究提供基础.