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目的:观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk基因,自杀基因)与阿昔洛韦(ACV)系统对人肝癌细胞的体外杀伤效果.方法:体外培养已感染含HSV-tk基因的重组逆转录病毒的PA317-tk细胞,获取含HSV-tk基因的重组逆转录病毒颗粒.用后者感染人肝癌细胞株SMMC-7721,G418培养基筛选抗性克降SMMC-7721-tk,并以PCR技术检测HSV-tk基因判断转染成功与否.用形态学方法和MTT法检测ACV对SMMC-7721-tk细胞的杀伤作用.结果:SMMC-7721-tk细胞经PCR证实含PCR-tk基因.形态学观察显示,ACV浓度在0.01~l μg/ml时,SMMC-7721-tk细胞小部分死亡,在浓度自1 μg~1 000 μg/ml时,细胞大部分死亡;HE染色可见细胞凋亡.MTT法测定显示,ACV浓度自1 μg/ml开始即对SMMC-7721-tk细胞产生明显抑制作用,抑制率自49

作者:祝金泉;张焜和;黄德强;谢勇;陈江;王崇文

来源:江西医学院学报 2000 年 40卷 2期

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作者:
祝金泉;张焜和;黄德强;谢勇;陈江;王崇文
来源:
江西医学院学报 2000 年 40卷 2期
标签:
肝癌 HSV-tk/ACV 基因治疗
目的:观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk基因,自杀基因)与阿昔洛韦(ACV)系统对人肝癌细胞的体外杀伤效果.方法:体外培养已感染含HSV-tk基因的重组逆转录病毒的PA317-tk细胞,获取含HSV-tk基因的重组逆转录病毒颗粒.用后者感染人肝癌细胞株SMMC-7721,G418培养基筛选抗性克降SMMC-7721-tk,并以PCR技术检测HSV-tk基因判断转染成功与否.用形态学方法和MTT法检测ACV对SMMC-7721-tk细胞的杀伤作用.结果:SMMC-7721-tk细胞经PCR证实含PCR-tk基因.形态学观察显示,ACV浓度在0.01~l μg/ml时,SMMC-7721-tk细胞小部分死亡,在浓度自1 μg~1 000 μg/ml时,细胞大部分死亡;HE染色可见细胞凋亡.MTT法测定显示,ACV浓度自1 μg/ml开始即对SMMC-7721-tk细胞产生明显抑制作用,抑制率自49