目的:探讨1α,25-二羟基维生素 D3对高糖刺激下大鼠肾小管上皮细胞中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响及其机制。方法将大鼠肾小管上皮细胞 NRK52E 传代培养。将传代培养后的细胞按是否加入干预剂分为3组:正常对照(A)组(D-葡萄糖6μmol·L-1)、高糖(B)组(D-葡萄糖30μmol·L-1)和1α,25-二羟基维生素 D3干预(C)组(1α,25-二羟基维生素 D35 nmol· L-1,预处理1 h,再给予 D-葡萄糖30μmol·L-1)。3组干预后再进行培养。将培养后的3组细胞按培养时间的不同分为3个亚组:Aa 12、24、48 h 3组,Bb 12、24、48 h 3组和 Cc 12、24、48 h 3组。采用 Real-time PCR 检测各组 CTGF mRNA 的表达水平,采用Western blot 检测各组 CTGF 蛋白、β-catenin 蛋白的表达水平。结果与 Aa 24 h 组比较,Bb 24 h 组 CTGF mRNA、CTGF 蛋白、β-catenin 蛋白表达水平均升高(均 P <0.01);与 Bb 24 h 组比较,Cc 24 h 组 CTGF mRNA、CTGF 蛋白、β-catenin 蛋白表达水平均降低(均 P <0.01)。结论在高糖体外培养的大鼠肾小管上皮细胞中1α,25-二羟维生素 D3能够显著降低高糖刺激的 CTGF 表达水平,其机制可能是阻断 Wnt/β-catenin 信号通路来实现的。
作者:叶玲;祝胜郎;陈结慧;蒋莹;朱恒梅
来源:南昌大学学报(医学版) 2016 年 56卷 3期