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目的 探究miR-134对蛛网膜下腔出血(SAH)后软脑膜纤维化的作用及其机制.方法 大鼠(40只)按照随机数字表法随机分2组,即假手术组(SHAM组,n=20)和模型组(SAH组,n=20);2组脑组织采用芯片分析技术筛选差异表达的miRNAs,并采用RT-qPCR对其进行验证;使用miRDB软件预测miR-134的靶蛋白,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-134对TGF-β1的靶向作用.采用western blot和RT-qPCR检测miR-134过表达和低表达的血管内皮细胞RAOEC中TGF-β1和CollagenⅠ表达.12只SAH大鼠随机分4组,各组颅骨后分别注射空白慢病毒(空白慢病毒组,n=3)、Lv-miR-134(Lv-miR-134组,n=3)、Lv-TGF-β1(Lv-TGF-β1组,n=3)和Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1(Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组,n=3),Masson染色观察各组软脑膜组织的纤维化.结果 与SHAM组比较,SAH组miR-134表达降低,TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达增高(均P<0.05).miR-134能够与TGF-β1的3′-UTR区域直接结合,并抑制其活性.血管内皮细胞中miR-134抑制TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达(P<0.05).与空白慢病毒组相比,Lv-miR-134组、Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组的纤维化程度降低(P<0.05),而Lv-TGF-β1组纤维化程度升高(P<0.05).结论 miR-134通过调控TGF-β1抑制SAH后软脑膜纤维化.

作者:杨培培;李铁柱;周金鑫;王忠海

来源:南昌大学学报(医学版) 2020 年 60卷 6期

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作者:
杨培培;李铁柱;周金鑫;王忠海
来源:
南昌大学学报(医学版) 2020 年 60卷 6期
标签:
蛛网膜下腔出血 miR-134 转化生长因子-β1 软脑膜纤维化 动物,实验 大鼠
目的 探究miR-134对蛛网膜下腔出血(SAH)后软脑膜纤维化的作用及其机制.方法 大鼠(40只)按照随机数字表法随机分2组,即假手术组(SHAM组,n=20)和模型组(SAH组,n=20);2组脑组织采用芯片分析技术筛选差异表达的miRNAs,并采用RT-qPCR对其进行验证;使用miRDB软件预测miR-134的靶蛋白,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-134对TGF-β1的靶向作用.采用western blot和RT-qPCR检测miR-134过表达和低表达的血管内皮细胞RAOEC中TGF-β1和CollagenⅠ表达.12只SAH大鼠随机分4组,各组颅骨后分别注射空白慢病毒(空白慢病毒组,n=3)、Lv-miR-134(Lv-miR-134组,n=3)、Lv-TGF-β1(Lv-TGF-β1组,n=3)和Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1(Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组,n=3),Masson染色观察各组软脑膜组织的纤维化.结果 与SHAM组比较,SAH组miR-134表达降低,TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达增高(均P<0.05).miR-134能够与TGF-β1的3′-UTR区域直接结合,并抑制其活性.血管内皮细胞中miR-134抑制TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达(P<0.05).与空白慢病毒组相比,Lv-miR-134组、Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组的纤维化程度降低(P<0.05),而Lv-TGF-β1组纤维化程度升高(P<0.05).结论 miR-134通过调控TGF-β1抑制SAH后软脑膜纤维化.