目的:构建含有人前列腺干细胞抗原(PSCA)主要T细胞表位的DNA疫苗(pVAX1-PSCA3-Fc-GPI-IRES-GM/B7,简称pVAX1-PSCA3FcGB),并在Cos7细胞中表达.方法:重叠延伸PCR合成异种化PSCA基因片段,同尾酶法将该片段3拷贝串联(PSCA3)后插入pCI-Fc-GPI载体中,再将PSCA3-Fc-GPI融合基因片段经酶切后导入真核表达载体pVAX1-IRES-GM/B7中,构建pVAX1-PSCA3FcGB疫苗,并检测其真核表达情况.结果:经测序异种种化PSCA片段与设计一致,PCR和酶切鉴定证明pVAX1-PSCA3FcGB构建成功;间接免疫荧光和流式细胞仪检测结果显示,该疫苗在Cos7细胞中获得较好表达.结论:成功构建DNA疫苗pVAX1-PSCA3FcGB,并在Cos7细胞中有效表达,为下一步的DNA疫苗功能研究奠定了重要基础.
作者：韩刚；高江平；阎瑾琦；贾锐；张亮；董金凯；田仁礼；王晓雄；于继云
来源：军医进修学院学报 2009 年 30卷 1期
