背景 氟可诱导破骨细胞分泌多种酶,使其吸收骨质的功能增强或减弱,从而溶骨或成骨,破骨细胞活化后骨吸收过程又与自噬密切相关.目的 探究氟通过AKT/mTOR/ULK1信号通路对破骨细胞自噬的影响.方法 采用RAW264.7细胞诱导形成的破骨细胞进行实验,分为对照组、NaF组、CQ组、CQ+NaF组、RAP组、RAP+NaF组,分别对相应组进行10 mg/L NaF、5 mmol/L CQ和5 mmol/L RAP给药,24 h后进行激光共聚焦显微镜检测,对破骨细胞自噬小体进行定量;荧光定量PCR检测Cathepsin K和TRAP的基因转录表达;Western blotting检测AKT/mTOR/ULKl磷酸化蛋白p-AKT、p-mTOR、p-ULK1水平,探究自噬在染氟破骨细胞的作用.结果 激光共聚焦显微镜结果显示10mg/L氟化钠溶液能够促进自噬小体的产生,自噬小体的数量明显增多,氟化钠协同RAP激动自噬.荧光定量PCR结果显示氟化钠使Cathepsin K基因和TRAP基因的表达降低,并且氟化钠与CQ对两种基因的表达降低有协同作用,氟化钠拮抗RAP,激发自噬,抑制Cathepsin K和TRAP基因上调.Western blotting显示氟化钠能够使p-AKT和p-mTOR蛋白表达量上调,并且能协同RAP使p-AKT、p-mTOR和p-ULK1表达量增高.结论 10 mg/L氟化钠溶液促进破骨细胞自噬,抑制其骨吸收能力从而成骨,可能与AKT/mTOR/ULK1信号通路有关.

作者：张馨怡；刘文涛；李利娟；柴冰茹；徐枭喻；白生宾

来源：解放军医学院学报 2022 年 43卷 9期