目的 探讨长链非编码RNA(Lnc RNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖、凋亡和成骨分化的影响及可能机制.方法 以成骨诱导液诱导hBMSCs,分别于诱导后0 d和1、3、7、14 d采用RT-qPCR检测细胞中碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、CCAT1和miR-335-3p基因表达水平.转染CCAT1小干扰RNA或miR-335-3p模拟物(mimics)至hBMSCs,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测hBMSCs存活率、流式细胞术检测细胞凋亡率、RT-qPCR检测细胞中ALP、RUNX2和OCN基因表达,蛋白印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-335-3p与CCAT1调控关系.以健康体检者为对照,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测OP患者血清中CCAT1和miR-335-3p表达水平.结果 随着诱导时间的增加,hBMSCs中ALP、RUNX2、OCN及CCAT1基因表达水平逐渐升高(P<0.05),miR-335-3p表达水平逐渐降低(P<0.05).低表达CCAT1或高表达miR-335-3p后,hBMSCs存活率和CyclinD1蛋白水平降低(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05),ALP、RUNX2和OCN水平降低(P<0.05).CCAT1在hBMSCs细胞中靶向负调控miR-335-3p表达.低表达miR-335-3p逆转了

作者：刘建民；袁之木；戚荣富；孙文建

来源：颈腰痛杂志 2021 年 42卷 1期