目的 探讨在灌注型生物反应器中,大段磷酸三钙(β-TCP)载体内不同流速对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)增殖及成骨分化的影响.方法 利用灌注型生物反应器对复合了hMSCs的大段β-TCP载体分别以3、6、9 mL/min的流速培养15 d,通过葡萄糖消耗量、细胞活力(MTT比色法)以及扫描电镜(SEM)观测细胞在载体内的增殖情况;以Real-time PCR检测成骨分化相关基因的表达.结果 各组葡萄糖的日消耗量随培养时间的延长而增加,初期9 mL/min组细胞增殖明显快于3、6 mL/min组(P＜0.001),但是灌注培养后期6 mL/min组的细胞增殖快于9、3 mL/min组(P＜0.05).灌注培养15 d后,6 mL/min组细胞活力显著高于3、9 mL/min组(P ＜0.001).SEM观察发现3组β-TCP载体内均形成复合细胞层,3 mL/min组细胞层呈疏松的簇状,6 mL/min组复合细胞层部分呈膜片状,9 mL/min组复合细胞层多数呈膜片状.在进行成骨诱导灌注培养15 d后,6、9 mL/min组碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OP)的表达均显著高于3 mL/min组(P＜0.01);3、6 mL/min组骨钙素(OC)的表达基本相同(P＞0.05),而9 mL/min组OC的表达量则显著高于另外两组(P ＜0.001).结论 在利用灌注型生物反应器对hMSCs进行灌注培养的早期,9 mL/min的流速最有利于hMSCs的增殖,而晚期6 m

作者：孙晓江；戴尅戎；谢幼专；汤亭亭；于志锋；张书红

来源：医用生物力学 2012 年 27卷 5期