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目的 构建结核分枝杆菌ESAT-6、CFP10、phoS2/pET28a表达重组质粒,并原核表达重组蛋白.方法 将目的 基因亚克隆到pET-28a表达载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3)plysS,诱导表达重组蛋白ESAT-6、CFP10、phoS2.结果 成功构建基因工程菌株ESAT-6、CFP10、phoS2/pET-28a/BL21(DE3)plysS,表达重组蛋白ESAT-6、phoS2,因以包涵体形式存在,无法纯化.结论 成功构建结核分枝杆菌ESAT-6、CFP10、phoS2/pET28a重组质粒,分别表达分子量约10×103 、31×103的ESAT-6、phoS2重组蛋白,但无法纯化,CFP10不表达.

作者:丁淑琴;师志云;董辉;杨风琴;朱佳佳

来源:检验医学与临床 2013 年 10卷 4期

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丁淑琴;师志云;董辉;杨风琴;朱佳佳
来源:
检验医学与临床 2013 年 10卷 4期
标签:
结核分枝杆菌 ESAT-6 CFP10 phoS2 重组质粒 原核表达
目的 构建结核分枝杆菌ESAT-6、CFP10、phoS2/pET28a表达重组质粒,并原核表达重组蛋白.方法 将目的 基因亚克隆到pET-28a表达载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3)plysS,诱导表达重组蛋白ESAT-6、CFP10、phoS2.结果 成功构建基因工程菌株ESAT-6、CFP10、phoS2/pET-28a/BL21(DE3)plysS,表达重组蛋白ESAT-6、phoS2,因以包涵体形式存在,无法纯化.结论 成功构建结核分枝杆菌ESAT-6、CFP10、phoS2/pET28a重组质粒,分别表达分子量约10×103 、31×103的ESAT-6、phoS2重组蛋白,但无法纯化,CFP10不表达.