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目的:构建结核分枝杆菌(MTb)1hp-esat6融合基因及其原核表达载体并进行表达.方法:用Gene SOEing法,将1hp基因和esat6基因体外重组,构建融合基因,克隆入pQE30质粒中进行表达.结果:构建的融合基因经测序证实完全正确,重组体转化表达菌DH5α后,经过IPTG诱导,表达出26kDa左右的CFP10-ESAT6融合蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h表达量最高,表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在于胞浆中,表达量占全菌蛋白质的40

作者:陈全;朱道银;骆旭东;蒋英;江山

来源:重庆医科大学学报 2003 年 28卷 3期

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作者:
陈全;朱道银;骆旭东;蒋英;江山
来源:
重庆医科大学学报 2003 年 28卷 3期
标签:
结核分枝杆菌 1hp-esat6融合基因 重组CFP10-ESAT6 原核表达
目的:构建结核分枝杆菌(MTb)1hp-esat6融合基因及其原核表达载体并进行表达.方法:用Gene SOEing法,将1hp基因和esat6基因体外重组,构建融合基因,克隆入pQE30质粒中进行表达.结果:构建的融合基因经测序证实完全正确,重组体转化表达菌DH5α后,经过IPTG诱导,表达出26kDa左右的CFP10-ESAT6融合蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h表达量最高,表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在于胞浆中,表达量占全菌蛋白质的40