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目的 构建副结核分枝杆菌SOD基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达.方法 以BamH I和EcoR I双酶切pGEM-T-SOD和pET-28a(+),并将纯化的SOD基因亚克隆至pET-28a(+)中,构建原核表达质粒pET-28a-SOD,并将其转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western bloting分析.结果 成功地构建出原核表达质粒pET-28a-SOD,并表达了约26.5kDa融合外源蛋白带,且具有牛副结核分枝杆菌抗原反应性.结论 副结核分枝杆菌SOD基因在大肠杆菌中获得了表达,并具有抗原反应性,为进一步研究SOD作为诊断试剂或亚单位疫苗奠定了基础.

作者:曾范利;胡玉庆;刘新宇;王春芳;姜秀云

来源:中国人兽共患病学报 2009 年 25卷 1期

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作者:
曾范利;胡玉庆;刘新宇;王春芳;姜秀云
来源:
中国人兽共患病学报 2009 年 25卷 1期
标签:
副结核分枝杆菌 SOD基因 原核表达
目的 构建副结核分枝杆菌SOD基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达.方法 以BamH I和EcoR I双酶切pGEM-T-SOD和pET-28a(+),并将纯化的SOD基因亚克隆至pET-28a(+)中,构建原核表达质粒pET-28a-SOD,并将其转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western bloting分析.结果 成功地构建出原核表达质粒pET-28a-SOD,并表达了约26.5kDa融合外源蛋白带,且具有牛副结核分枝杆菌抗原反应性.结论 副结核分枝杆菌SOD基因在大肠杆菌中获得了表达,并具有抗原反应性,为进一步研究SOD作为诊断试剂或亚单位疫苗奠定了基础.