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目的 建立牛乳中副结核分枝杆菌套式PCR检测方法,以便快速检测牛奶中副结核分枝杆菌 方法 在制备的液体培养基中培养副结核分枝杆菌T、P18、P10,提取基因组DNA,应用DNAstar引物设计软件,根据副结核分枝杆菌独特的稳定性插入片段IS900设计内、外引物,建立检测牛乳中副结核分枝杆菌的套式PCR方法,并对该法的敏感性、特异性进行验证.结果 用所建立的方法已成功扩增出目的基因,大小与预期一致;该法的敏感性为102个细菌/ml,特异性试验结果显示,除含副结核分枝杆菌的乳样为阳性外,含其他细菌的乳样均为阴性,表明本方法特异性强.结论 已成功建立套式PCR检测方法,可用于牛乳中副结核分枝杆菌的检测.

作者:巩强;巩红霞

来源:中国生物制品学杂志 2012 年 25卷 8期

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作者:
巩强;巩红霞
来源:
中国生物制品学杂志 2012 年 25卷 8期
标签:
副结核分枝杆菌 聚合酶链反应 牛乳
目的 建立牛乳中副结核分枝杆菌套式PCR检测方法,以便快速检测牛奶中副结核分枝杆菌 方法 在制备的液体培养基中培养副结核分枝杆菌T、P18、P10,提取基因组DNA,应用DNAstar引物设计软件,根据副结核分枝杆菌独特的稳定性插入片段IS900设计内、外引物,建立检测牛乳中副结核分枝杆菌的套式PCR方法,并对该法的敏感性、特异性进行验证.结果 用所建立的方法已成功扩增出目的基因,大小与预期一致;该法的敏感性为102个细菌/ml,特异性试验结果显示,除含副结核分枝杆菌的乳样为阳性外,含其他细菌的乳样均为阴性,表明本方法特异性强.结论 已成功建立套式PCR检测方法,可用于牛乳中副结核分枝杆菌的检测.