目的 对人乳头瘤病毒(HPV)16 E7基因中与宿主Rb蛋白结合区域进行突变获得HPV16 E7突变体(HPV16mE7)序列,原核表达获得HPV16mE7蛋白.方法 采用分子克隆技术扩增野生型HPV 16E7基因,设计特异性引物对目的基因进行定点突变并构建表达质粒,转化进入原核表达体系并通过IPTG诱导表达,表达产物大小及纯度经十二烷基硫钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,免疫原性经蛋白免疫印迹法(Western blot)鉴定.结果 准确按照设计突变目的基因特定位点,SDS-PAGE显示获得高纯度目的蛋白,Western blot结果显示目的蛋白具有良好的免疫原性.结论 成功对HPV16 E7进行定点突变并获得纯度较高免疫原性良好的突变表达蛋白.
作者：张战锋；刘媛瑞；徐建华
来源：检验医学与临床 2019 年 16卷 8期
