为建立一套适合于牡丹试管苗茎基部蛋白的双向电泳技术,以便更好地利用蛋白质组技术研究牡丹试管苗不定根的发生机理,本研究比较了三种不同蛋白质提取方法对双向电泳结果的影响,并在蛋白质上样量方面进行了比较.结果表明,乙酸铵/甲醇酚提取法所得2-DE图谱的蛋白点很少,仅检测到45个,且较模糊,有明显的拖尾现象,分辨率很低;乙醇/乙醚丙酮法所得的蛋白点也较少(101个),较模糊,且横竖纹干扰较大;三氯乙酸/丙酮法所得蛋白点数较多,可检测到434个清晰的蛋白点,且形状规则,重复性好,适合后续分析,操作也较为简便.用三氯乙酸/丙酮法提取蛋白,采用800μg、1000 μg和1 200μg三个不同的上样量进行双向电泳,在上样量为1200μg时(IPG pH 3～10,24 cm),蛋白质在12
作者：王海云；丁义；符真珠；何松林
来源：基因组学与应用生物学 2010 年 29卷 1期
