目的：检测不同氧浓度条件下椎间盘纤维环细胞Notch信号通路相关分子的表达变化，明确参与调节纤维环细胞增殖的相关靶基因。方法体外分离、培养大鼠纤维环细胞，运用CCK-8细胞活力检测试剂盒、流式细胞仪检测不同氧浓度培养条件下Notch信号通路抑制剂L685458（2μmol／L、4μmol／L、8μmol／L）对纤维环细胞增殖及细胞周期的影响；荧光定量RT-PCR检测不同氧浓度培养条件下纤维环细胞Notch信号表达水平变化。结果 CCK-8结果显示与常氧条件相比，低氧培养纤维环细胞时所测吸光度值明显升高；无论常氧或低氧条件，加入Notch抑制剂干预后所测吸光度值明显降低；流式细胞仪结果显示与常氧条件相比，低氧培养纤维环细胞处于S／G2期细胞所占百分率明显升高，加入Notch抑制剂干预后处于S／G2期细胞所占百分率明显降低。低氧干预8～24 h后， Notch3、Notch4、Delta-like1、Delta-like3、Hes1、Hes5、Hes7 mRNA都有不同水平上调，Hey2 mRNA表达水平下调。结论低氧可以通过上调Notch信号通路的表达水平促进纤维环细胞增殖， Notch 信号可能作为一个研究靶点用于延缓椎间盘退变的过程。
作者：马俊；张颖；陈元元；石长贵；袁文
来源：脊柱外科杂志 2015 年 1期
