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目的 比较SD大鼠正常与退变椎间盘来源髓核间充质干细胞(NPMSCs)的生物学性能.方法 获取正常(N-NPMSCs)及退变椎间盘来源NPMSCs(D-NPMSCs).流式细胞仪检测CD73、CD90、CD105、CD45及CD11b/c表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-2(Sox-2)、八聚体结合转录因子4(Oct-4)及Nanog干性基因表达.通过细胞形态、细胞克隆形成能力、细胞增殖及凋亡、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达活性,RT-PCR及Western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、沉默信息调节蛋白1(SIRT1)及沉默信息调节蛋白6(SIRT6)的mRNA及蛋白表达,比较不同来源NPMSCs的生物学特性.结果 N-NPMSCs及D-NPMSCs均高表达干细胞相关阳性表面抗原分子,低表达干细胞相关阴性表面抗原分子,但D-NPMSCs中干性基因表达(Sox-2:1.52 ±0.21,Nanog:2.15±0.16,Oct-4:1.73±0.11)较N-NPMSCs干性基因表达(Sox-2:3.41±0.94,Nanog:4.72±1.12,Oct-4:3.22±1.03)明显下降(t=6.145、6.556、7.806,P=0.000、0.000、0.000).两组细胞在形态学上差异无统计学意义,但D-NPMSCs细胞克隆形成率[(23.5±10.1)%]较N-NPMSCs[(39.4±12.2)%]明显下降(t=5.304,P=0.001).D-NPMSCs增

作者:刘洋;王静成;冯新民;胡乐;黄泽楠;南利平;王峰;周诗丰;张亮

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 6期

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刘洋;王静成;冯新民;胡乐;黄泽楠;南利平;王峰;周诗丰;张亮
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 6期
标签:
髓核间充质干细胞 椎间盘退变 增殖 凋亡 缺氧诱导因子-1α Nucleus pulposus mesenchymal stem cells Intervertebral disc degeneration Proliferation Apoptosis Hypoxia inducible factor-1α
目的 比较SD大鼠正常与退变椎间盘来源髓核间充质干细胞(NPMSCs)的生物学性能.方法 获取正常(N-NPMSCs)及退变椎间盘来源NPMSCs(D-NPMSCs).流式细胞仪检测CD73、CD90、CD105、CD45及CD11b/c表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-2(Sox-2)、八聚体结合转录因子4(Oct-4)及Nanog干性基因表达.通过细胞形态、细胞克隆形成能力、细胞增殖及凋亡、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达活性,RT-PCR及Western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、沉默信息调节蛋白1(SIRT1)及沉默信息调节蛋白6(SIRT6)的mRNA及蛋白表达,比较不同来源NPMSCs的生物学特性.结果 N-NPMSCs及D-NPMSCs均高表达干细胞相关阳性表面抗原分子,低表达干细胞相关阴性表面抗原分子,但D-NPMSCs中干性基因表达(Sox-2:1.52 ±0.21,Nanog:2.15±0.16,Oct-4:1.73±0.11)较N-NPMSCs干性基因表达(Sox-2:3.41±0.94,Nanog:4.72±1.12,Oct-4:3.22±1.03)明显下降(t=6.145、6.556、7.806,P=0.000、0.000、0.000).两组细胞在形态学上差异无统计学意义,但D-NPMSCs细胞克隆形成率[(23.5±10.1)%]较N-NPMSCs[(39.4±12.2)%]明显下降(t=5.304,P=0.001).D-NPMSCs增