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目的 探讨血管内皮生长因子-B(vascular endothelial growth factor-B,VEGF-B)对高糖环境下诱导的人视网膜色素上皮细胞(cultured human retinal pigmentepithelial cells-19,ARPE-19)凋亡的保护作用及其机制.方法 将ARPE-19细胞分为正常组(体积分数10%胎牛血清+5.6 mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(体积分数10%胎牛血清+30 mmol·L-1葡萄糖)、药物组(100μg·L-1 VEGF-B+体积分数10%胎牛血清+30 mmol·L-1葡萄糖)、抑制组[20μmol·L-1 PD98059(ERK1/2阻滞剂)+100μg·L-1 VEGF-B+体积分数10%胎牛血清+30 mmol·L-1葡萄糖].倒置显微镜观察细胞的形态变化;CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测蛋白Bcl-2、Bax及细胞外信号调节激酶1/2(extracelluar regulated protein 1/2,ERK1/2)、p-ERK1/2表达水平;实时荧光定量PCR检测Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达.结果 倒置显微镜发现,高糖组细胞皱缩变小变圆,正常组及药物组细胞体积大、有突起,抑制组细胞形态及数量接近正常组,少许细胞皱缩变圆,体积变小.CCK-8法检测显示,高糖组细胞较正常组存活率降低,药物组较高糖组细胞存活率升高,抑制组细胞存活率介于高糖组和药物组之间,差异均有统计学意义(均为P<0.05).流式细胞仪检测显示,高糖组较

作者:赖诚;李明新

来源:眼科新进展 2020 年 40卷 5期

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作者:
赖诚;李明新
来源:
眼科新进展 2020 年 40卷 5期
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VEGF-B ARPE-19细胞株 高浓度葡萄糖 凋亡 ERK1/2信号通路
目的 探讨血管内皮生长因子-B(vascular endothelial growth factor-B,VEGF-B)对高糖环境下诱导的人视网膜色素上皮细胞(cultured human retinal pigmentepithelial cells-19,ARPE-19)凋亡的保护作用及其机制.方法 将ARPE-19细胞分为正常组(体积分数10%胎牛血清+5.6 mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(体积分数10%胎牛血清+30 mmol·L-1葡萄糖)、药物组(100μg·L-1 VEGF-B+体积分数10%胎牛血清+30 mmol·L-1葡萄糖)、抑制组[20μmol·L-1 PD98059(ERK1/2阻滞剂)+100μg·L-1 VEGF-B+体积分数10%胎牛血清+30 mmol·L-1葡萄糖].倒置显微镜观察细胞的形态变化;CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测蛋白Bcl-2、Bax及细胞外信号调节激酶1/2(extracelluar regulated protein 1/2,ERK1/2)、p-ERK1/2表达水平;实时荧光定量PCR检测Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达.结果 倒置显微镜发现,高糖组细胞皱缩变小变圆,正常组及药物组细胞体积大、有突起,抑制组细胞形态及数量接近正常组,少许细胞皱缩变圆,体积变小.CCK-8法检测显示,高糖组细胞较正常组存活率降低,药物组较高糖组细胞存活率升高,抑制组细胞存活率介于高糖组和药物组之间,差异均有统计学意义(均为P<0.05).流式细胞仪检测显示,高糖组较